Como você sabe, existem sinais respiratórios, neurológicos e intestinais tanto para infecções clínicas quanto subclínicas!
A doença de Newcastle pode ser classificada em cinco categorias diferentes:
■ Velogênica viscerotrópica: uma forma altamente patogênica na qual lesões intestinais hemorrágicas são frequentemente observadas.
■ Velogênica neurotrópica: uma forma que apresenta alta mortalidade, geralmente após sinais respiratórios e neurológicos.
■ Mesogênica: uma forma que se manifesta com sinais respiratórios, sinais neurológicos ocasionais, mas baixa mortalidade.
■ Lentogênica ou respiratória: uma forma que se manifesta com infecção respiratória leve ou subclínica.
■ Assintomática: uma forma que geralmente consiste em infecção entérica subclínica.
Com vírus velogênicos, a doença pode aparecer repentinamente, com alta mortalidade ocorrendo na ausência de outros sinais clínicos. Em outros casos, os sinais clínicos geralmente começam com letargia, respiração aumentada e fraqueza, diarreia, terminando com prostração e morte.
Nos casos envolvendo isolados velogênicos neurotrópicos, sinais neurológicos como torcicolo ou movimentos colônicos da cabeça ou das pernas são frequentemente observados alguns dias após o início da infecção. Uma queda dramática na produção de ovos pode ser vista em poedeiras e matrizes. A taxa de morbidade pode atingir 100%.
Os sinais clínicos induzidos por isolados classificados como mesogênicos geralmente se limitam a sinais respiratórios e queda na produção de ovos em galinhas poedeiras. Sinais neurológicos podem ocorrer, mas não são comuns. A taxa de mortalidade é geralmente baixa.
Finalmente, cepas lentogênicas geralmente não causam doença em adultos, mas em aves jovens totalmente suscetíveis, problemas respiratórios podem ser observados. Tais reações podem ser complicadas por infecções com outros patógenos.
Cepas apatogênicas não induzem sinais clínicos (forma assintomática). Da mesma forma, para sinais clínicos, a extensão e localização das lesões macroscópicas dependem da cepa viral, das condições do hospedeiro e de todos os fatores mencionados que afetam a gravidade da doença. Além disso, não há lesões patognomônicas associadas à DN.
No trato respiratório, podem ser observadas hemorragias mucosas, congestão acentuada da traqueia e aerossaculite. Lesões hemorrágicas no trato digestivo, particularmente na mucosa do proventrículo, cecos, intestino delgado e tecidos linfóides como tonsilas cecais e placas de Peyer, são comumente vistas.
Em galinhas poedeiras, o conteúdo do ovo na cavidade abdominal e folículos ovarianos flácidos e degenerados são frequentemente encontrados. Finalmente, mesmo em galinhas com sinais neurológicos, lesões macroscópicas não são observadas no sistema nervoso central.
Diagnóstico da DN
A DN em sua forma velogênica é uma doença notificada, portanto, um diagnóstico adequado deve ser realizado. Como os sinais clínicos ou lesões macroscópicas não são patognomônicos, ferramentas laboratoriais são necessárias para confirmar a infecção por NDV. E, uma vez que infecções com cepas lentogênicas e/ou vacinais não são notificáveis, a determinação da virulência do vírus é necessária.
De fato, várias técnicas laboratoriais estão disponíveis. Embora a sorologia não deva ser usada como uma ferramenta diagnóstica definitiva em países onde a vacinação contra a DN é rotineiramente utilizada, pode fornecer informações muito úteis se realizada em amostras pareadas coletadas com duas a três semanas de diferença.
A isolação e identificação do vírus continuam sendo as ferramentas principais para alcançar o diagnóstico. Material suspeito coletado de swabs traqueais, orofaringeos ou cloacais ou de amostras de órgãos é processado e inoculado em ovos embrionados SPF de 9 a 11 dias. Após sete dias de incubação, a atividade hemaglutinadora (HA) no fluido alantoico é testada. As amostras positivas para HA devem ser testadas para inibição específica com antissoro para NDV.
A detecção direta do RNA viral a partir de amostras de swabs ou tecidos usando técnicas moleculares, como RT-PCR e sequenciamento, é amplamente utilizada atualmente. Essas técnicas são extremamente úteis para identificar NDV, determinar sua virulência e genótipo, mas ainda são caras e requerem expertise. Laboratórios de referência podem ser usados para alcançar um diagnóstico adequado desta doença.
TESTES SOROLÓGICOS
O NDV pode ser utilizado como antígeno em uma ampla gama de testes sorológicos, permitindo que testes de neutralização ou ensaios imunoenzimáticos (ELISA) e HI sejam usados para avaliar os níveis de anticorpos em aves. Atualmente, o teste HI é o mais amplamente utilizado para detectar anticorpos contra APMV-1 em aves, enquanto o uso de kits comerciais ELISA para avaliar os níveis de anticorpos pós-vacinação é comum.
Em geral, os títulos de neutralização viral ou HI e os títulos derivados de ELISA correlacionam-se no nível do lote, em vez do nível de aves individuais. Os ensaios sorológicos também são utilizados em laboratórios diagnósticos para avaliar a resposta de anticorpos após a vacinação, mas têm valor limitado na vigilância e diagnóstico da DN devido ao uso quase universal de vacinas em aves domésticas.
Existem uma variedade de kits comerciais ELISA disponíveis, baseados em várias estratégias diferentes para a detecção de anticorpos contra NDV, incluindo ELISAs indiretos, sanduíche e bloqueio ou competitivo usando MAbs. Pelo menos um kit utiliza um antígeno de subunidade. Normalmente, esses testes são avaliados e validados pelo fabricante, sendo importante seguir cuidadosamente as instruções especificadas para seu uso.
O teste HI e o ELISA podem medir anticorpos contra diferentes antígenos; dependendo do sistema utilizado, os ELISAs podem detectar anticorpos contra mais de um antígeno, enquanto o teste HI provavelmente está restrito àqueles direcionados contra a proteína HN. No entanto, estudos comparativos demonstraram que os ELISAs são reprodutíveis e têm alta sensibilidade e especificidade; eles têm se mostrado bem correlacionados com o teste HI (Brown et al., 1990).